宿主細胞殘留蛋白HCP詳細介紹:
中國倉鼠卵巢細胞宿主蛋白酶聯(lián)檢測試劑盒是用來定量分析以中國倉鼠卵 巢細胞(Chinese Hamster Ovary cells,CHO)為表達細胞的生物藥物中宿主蛋白 雜質(zhì)的試劑盒。首先,用不同濃度的CHO標準蛋白制作一條標準曲線,然后再根 據(jù)標準曲線來分析生物藥物中宿主細胞殘留蛋白的含量。具體方法為:先將CHO 標準蛋白或者待測樣品適當稀釋后加入已包被好抗CHO宿主蛋白抗體的96孔平 板中。經(jīng)過1.5小時的保溫,宿主細胞蛋白與已經(jīng)固定在平板上的抗體結合形成 抗原-抗體復合物。此復合物被隨后加入的生物素標記的抗CHO宿主蛋白的抗體 結合并進一步形成更高級的復合物,反應45分鐘后洗去未結合的物質(zhì)。再加入鏈 霉親合素-辣根過氧化物酶復合物,靜置30分鐘。因鏈霉親合素可以與任何帶生 物素標記的抗體相結合,從而使鏈霉親合素-辣根過氧化物酶復合物連接到平板 上。接下來沖洗掉未結合的物質(zhì),加入TMB底物。固相上的酶催化底物產(chǎn)生顏色 反應,待顏色反應一段時間后,終止反應。用酶標儀在450 nm波長下測定其結果, 此結果能間接地反應結合到平板上的的宿主細胞蛋白數(shù)量的多少。根據(jù)CHO宿主 蛋白標準曲定量分析生物藥物中宿主細胞殘留蛋白的含量。
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